누치 (Hemibarbus labeo) 난황전구단백질의 RT-PCR 검출 및 estrogen에 의한 유도

초록

누치(Hemibarbus labeo)은 잉어목 잉어과의 어류로 한반도의 서남해로 유입되는 하천, 만주, 중국동남부, 일본남서부에 분포하하는 대형 담수어류이다. 담수환경내에 존재하는 내분비계교란물질 (Endocrine disrupting compound, EDC)의 축적이 기대되는 어류이다. 최근 다양한 내분비교란물질에 의해 야생생물에서의 생식교란 현상이 관찰되고 있다. 특히 여성호르몬과 유사한 생리활성을 갖는 물질들을 검색하기 위한 다양한 생물학적 지표가 개발, 활용되고 있는데 난생 척추동물수컷의 간조직 또는 혈액에서 발견되는 난황전구단백질 (vitellogenin)은 xenoestrogen의 노출 검색의 중요한 지표로 이용되고 있다. 본 연구에서는 국내 담수환경에서 xenoestrogen의 노출 및 검색과 그 위해성 평가에 누치를 모델생물로 이용하기 위한 연구의 일환으로 누치의 난황전구단백질 (vitellogenin) cDNA 염기서열에 근거하여 semiquantitative RT-PCR 조사법을 최적화 하였고 estrogen과 nonylphenol에 의한 vitellogenin mRNA의 유도현상을 조사하였다. 2003년 춘계 한강 수계에서 채집된 암컷의 간으로부터 cDNA를 제조하였고 경골어류 vitellogenin cDNA 염기서열 상동성을 비교하여 보존된 부위의 염기서열에 대한 다양한 degenerative primer를 제조하여 PCR 반응을 수행하여 308bp의 cDNA절편에 대한 염기서열을 확정하였다. RT-PCR 방법으로 암컷에서 다량의 VTG mRNA 발현이 확인되었고 수컷에서도 미량 검출되었으나 암컷은 104 이상의 vitellogenin을 발현하였다. 17 beta estradiol 처리한 수컷에서 암컷의 1/2에 상당하는 vitellogenin이 유도되었다. Nonylphenol을 처리한 수컷에서 미량의 vitellogenin이 유도되어 누치 수컷을 모델로 xenoestrogen의 노출에 따른 vitellogenin 유도에 대한 추적이 가능할 것으로 사료된다. 향 후 한국 내 담수환경에서 내분비계장애물질의 생물학적 추적에 유용할 것이다.